相差光學(xué)顯微鏡用于觀(guān)察細胞不同結構之間細微差別
使用明視野顯微鏡并不能夠清楚觀(guān)察未染色的活細胞及其內部結構
,這是因為細胞與水環(huán)境或細胞內部結構之間的對比度太小。不過(guò)
細胞的不同結構之間確實(shí)存在密度上的細微差別,從而能夠將通過(guò)
其中的光線(xiàn)有所改變。相差光學(xué)顯微鏡(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“相差顯微鏡”)
可以很容易的將這種細微的改變轉化成為可檢測出的光強變化。因
此這種顯微鏡非常適用于觀(guān)察活細胞。
與普通光學(xué)顯微鏡相比,相差顯微鏡有另外兩個(gè)部件:一個(gè)是
位于物鏡后聚焦面的相板;另外一個(gè)是與相板相匹配的位于聚光器
上的環(huán)形光闌,它是一個(gè)黑色圓盤(pán),上面帶有一個(gè)透明圈。相板上
有一環(huán)狀區域,經(jīng)過(guò)其中的光線(xiàn)不會(huì )發(fā)生改變,而經(jīng)過(guò)環(huán)狀區域以
外的其他區域的光線(xiàn)則會(huì )被延遲1“波長(cháng)(入)。
【實(shí)驗方法】
1.制備枯草芽孢桿菌水浸片。
2.將標本置于載物臺上。
3.先轉至10倍物鏡,同時(shí)將環(huán)形光闌也調至10倍位置,用粗調
節旋鈕和細調節旋鈕將物像調至清晰。
4.將目鏡取下,換上合軸調整望遠鏡,調整至亮環(huán)與暗環(huán)都
清晰,固定合軸調整望遠鏡。
5.調節聚光器至兩環(huán)相互重疊。
6.將目鏡重新安上,用細調節旋鈕將圖像調節清晰并觀(guān)察。
7.按同樣的方法分別用40倍物鏡和油鏡觀(guān)察,同時(shí)要將環(huán)形光
闌也調至相應位置。記錄觀(guān)察結果。
8.按照相同的步驟在40倍物鏡下觀(guān)察釀酒酵母。